Какво е ELISA Microplate Reader?
Четецът за микроплаки, тоест ензимно-свързан имуносорбентен анализ, е специален инструмент за ензимно-свързан имуносорбентен анализ. Всъщност това е специален фотоелектричен колориметър или прикрит спектрофотометър и основният му принцип на работа е по същество същият като основната структура и фотоелектричния колориметър. Той може просто да бъде разделен на две категории, полуавтоматичен и напълно автоматичен, но принципите им на работа са едни и същи. Неговото ядро е колориметър, тоест колориметричният метод се използва за анализ на съдържанието на антиген или антитяло. Определянето с ELISA обикновено изисква крайният обем на тестовия разтвор да бъде по-малък от 250 μL и тестът не може да бъде завършен с общ фотоелектричен колориметър, така че има специални изисквания за фотоелектричния колориметър в четеца на микроплаки.
Принцип
Четецът за микроплаки всъщност е прикрит фотоелектричен колориметър или спектрофотометър със специална цел и основният му принцип на работа е основно същият като основната структура и фотоелектричния колориметър. Фигурата показва работата на едноканален автоматичен четец на микроплаки за вземане на проби. Схематична диаграма. Светлинната вълна, излъчвана от лампата на източника на светлина, се трансформира в монохроматична светлина от филтъра или монохроматора и влиза в изпитвания образец в пластмасовия микропорьозен стълб. Част от монохроматичната светлина се абсорбира от образеца, а другата част се предава през образеца. Осветен към фотодетектора, фотодетекторът преобразува различните светлинни сигнали на образеца, който ще бъде тестван, в съответните електрически сигнали. Електрическите сигнали се обработват чрез предварително усилване, логаритмично усилване и аналогово-цифрово преобразуване. Въведете микропроцесора за обработка и изчисляване на данни и накрая изведете резултатите от дисплея и принтера. Микропроцесорът също така контролира движението на механичния задвижващ механизъм в посока X и посока Y, за да премести микроплочата през управляващата верига, така че да реализира процеса на автоматично откриване на проби. Други четци за микроплаки използват ръчно движение на микроплаката за откриване, така че механичният задвижващ механизъм и управляващата верига в посоките X и Y са пропуснати, така че инструментът да е по-малък и структурата е по-проста.
Микроплаката е прозрачна пластмасова плака, специално използвана за поставяне на пробата, която ще бъде тествана. Плаката има множество редове малки дупки с еднакъв размер и съответният антиген или антитяло е вграден в дупката. Всяка малка дупка може да побере няколко десет милилитра разтвор.
Светлината е електромагнитна вълна. Дължината на вълната от 100nm-400nm се нарича ултравиолетова светлина, светлината между 400nm и 780nm може да бъде наблюдавана от човешкото око, а дължината на вълната, по-голяма от 780nm, се нарича инфрачервена светлина. Хората могат да виждат само цветове, защото светлината удря обекта и се отразява обратно от обекта. Зелените растения са зелени, защото повечето растения поглъщат червено-оранжева светлина и синьо-виолетова светлина, но те не поглъщат и отразяват зелено, така че растенията изглеждат зелени. Принципът на измерване на четеца на микроплаки е да се открие абсорбцията на аналита при специфична дължина на вълната.
Структура
Има 40-ямкови плаки, 55-ямкови плаки, 96-ямкови плаки и т.н. Различните инструменти използват различни плочи с отвор, които могат да бъдат тествани един по един или ред по ред.
Монохроматичната светлина, използвана от четеца на микроплаки, може да бъде получена или чрез кохерентен филтър, или същия монохроматор като спектрофотометър. Когато използвате филтър като филтърно устройство, той е същият като обикновен колориметър. Може да се постави пред микроплаката или зад микроплаката. След кондензатора, диафрагмата достига до рефлектора, тя се отразява от рефлектора на 90° и преминава през колориметричния разтвор вертикално, след което се изпраща през филтъра. Към фотоклетката.
От работната блокова диаграма и диаграмата на светлинния път на четеца на микроплаки се вижда, че той има следните разлики с обикновените фотоелектрични колориметри:
(L) Контейнерът за колориметричния разтвор, който трябва да бъде тестван, вече не използва кювета, а пластмасова микроплака. Микроплаката обикновено е изработена от прозрачен полиетиленов материал, който има силен адсорбционен ефект върху антигена и антитялото, така че се използва. Той действа като твърд фазов носител.
⑵Тъй като пластмасовата микроплака, съдържаща пробата, е многоредова пореста, светлината може да преминава само вертикално, така че светлинният лъч на четеца на микроплака преминава през разтвора, който трябва да бъде тестван, и през микроплаката вертикално. Светлинният лъч може да бъде отгоре надолу или може да преминава през колориметричната течност отдолу нагоре.
⑶ Четеците на микроплаки обикновено не само използват A, но понякога използват и оптична плътност OD, за да изразят абсорбцията. Четеците за микроплаки могат да бъдат разделени на два вида: едноканални и многоканални, а едноканалните се разделят на два вида: автоматични и ръчни. Автоматичен тип инструмент Има механичен задвижващ механизъм в посоките X и Y, който може да изпраща малките дупки на микроплаката L един по един под лъча за тестване, а ръчният тип използва ръчното движение на микроплаката за измерване.
На базата на едноканалния четец на микроплаки е разработен многоканален четец на микроплаки. Този тип четец на микроплаки обикновено е автоматизиран. Той няма множество лъчи и множество фотодетектори, като 12-канален инструмент с 12 лъча или 12 източника на светлина, 12 детектора и 12 усилвателя, под действието на механичното задвижващо устройство в посока X, 12 проби се откриват в ред. Скоростта на откриване на многоканалния четец за микроплаки е бърза, но структурата му По-сложните цени също са по-високи.
Обхват на приложение на четеца за микроплаки
Хематологичен тест Тест за тромбоцитни антитела PAIgA, PAIgG, PAIgM
Определяне на D-димер D-димер
Определяне на продуктите от разграждането на серумния фибрин FDP
Определяне на Т3, Т4 с трийодтиронин и тетрайодтиронин
Имунологичен тест Определяне на C-реактивен протеин CRP
Определяне на имуноглобулин IgD, IgE
Определяне на циркулиращи имунни комплекси CIC
Определяне на ревматоиден фактор IgG, IgA, IgM RF
Анти-тиреоглобулиново антитяло, определяне на микрозомални антитела TG, TM
Имунологично откриване на туморен рак Определяне на алфа-фетопротеин AFP
Определяне на карциноембрионален антиген CEA
Определяне на простатен специфичен антиген PSA
Определяне на рак на панкреаса, рак на жлъчните пътища, рак на стомаха CA19-9
Определяне на рак на яйчниците CA125
Определяне на рак на гърдата CA15-3
Определяне на цервикален плоскоклетъчен карцином SCC
Откриване на множествен рак на костния мозък
Определяне на рак на щитовидната жлеза hTG
Имунологичен тест за инфекциозни заболявания, серологичен тест за хепатит А, анти-HAV-IgM
Серологичен тест за хепатит В Два и половина чифта
Серологично откриване на хепатит C Anti-HAV-IgG, anti-HCV-IgM
Серологично откриване на хепатит D Anti-HDV-IgG, anti-HDV-IgM
Серологично откриване на хепатит Е Anti-HEV-IgG
Откриване на антитела срещу хеморагична треска с бъбречен синдром HFRS-IgG
Откриване на антитела IgM на японския енцефалит
Откриване на антитела на човешкия имунодефицитен вирус (т.е. регионален СПИН) HIV β 2 M
Функционален тест за пренатална и постнатална грижа Тест за токсоплазмен вирус TOXO
Откриване на вируса на рубеола RV
Откриване на цитомегаловирус CMV
Откриване на херпес симплекс вирус Anti-HSV (Ⅰ, Ⅱ)
Други могат също да правят генетични тестове и остатъци от животни, предмети за проверка на остатъци от пестициди и др.
